糞大腸菌群與大腸菌群相似，主要以其檢出 情況來(lái)判斷食品是否受到糞便污染。糞便中既有 正常腸道菌，也可能有腸道致病菌(如沙門(mén)氏菌、 志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌等)。因此，食 品受到糞便污染就對(duì)食用者造成潛在的危害。通 常情況下，糞大腸菌群與大腸菌群相比，在人和 動(dòng)物糞便中所占的比例較大，而且由于糞大腸菌 群在自然界容易死亡等原因，該菌群的存在可認(rèn) 為食品直接或間接受到了近期的糞便污染。

1 材料與方法 

1.1 材料與設(shè)備 

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料 

大腸埃希氏菌(Escherichia coli)： ATCC25922，美國(guó)ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株庫(kù)；月桂基 硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯、EC肉湯培養(yǎng)基： 北京陸橋技術(shù)股份有限公司；無(wú)菌生理鹽水 (0.85%NaCl)、無(wú)菌1mol/L NaOH、無(wú)菌1mol/L HCl。 

1.1.2 儀器設(shè)備 

LRH-150恒溫培養(yǎng)箱：鄭州生元 儀器有限公司；SHA-C恒溫水浴箱：常州諾基儀 器有限公司；BXM-30R高壓蒸汽滅菌器：上海博 訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；SW-CJ-2D超凈工作 臺(tái)：滬凈凈化公司；JY 5002電子天平：上海良平 儀器儀表有限公司；HN-08均質(zhì)器：上海汗諾儀 器有限公司；XW-80A振蕩器：海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司。 

1.2 檢測(cè)方法 

1.2.1 國(guó)標(biāo)方法(GB 4789.39—2013) 

將25 g(mL) 檢樣加入225 mL稀釋液，均質(zhì)，10倍系列稀釋?zhuān)? 選擇適宜3個(gè)連續(xù)稀釋度的樣品勻液，接種LST肉 湯管，每管接種1 mL(如接種量需要超過(guò)1 mL，則 用雙料LST肉湯)，(36±1)℃培養(yǎng)24～48 h，產(chǎn)氣 管進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)，取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于EC肉 湯管中，(44.5±0.2)℃水浴培養(yǎng)(24±2)h，計(jì)EC發(fā) 酵管陽(yáng)性管數(shù)，查MPN表報(bào)告結(jié)果。 

1.2.2 改進(jìn)方法

將25 g(mL)檢樣加入225 mL 稀釋液，均質(zhì)，10倍系列稀釋?zhuān)x擇適宜3個(gè)連續(xù) 稀釋度的樣品勻液，直接接種EC肉湯管，每管接 種1 mL(如接種量需要超過(guò)1 mL，則用雙料EC肉 湯)，(44.5±0.2)℃水浴培養(yǎng)(24±2)h，計(jì)EC發(fā)酵 管陽(yáng)性管數(shù)，查MPN表報(bào)告結(jié)果。

2 結(jié)果與討論

準(zhǔn)備3份不同濃度大腸埃希氏菌(Escherichia coli)菌液，分別為低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/ mL)、高(110 MPN/mL)3個(gè)濃度值，分別使用國(guó)標(biāo) 方法和改進(jìn)方法重復(fù)7次檢測(cè)糞大腸菌群。對(duì)20個(gè)實(shí)際瓜子樣品進(jìn)行糞大腸 菌群檢測(cè)，國(guó)標(biāo)方法與改進(jìn)方法的陽(yáng)性發(fā)酵管數(shù) 存在不一致情況；國(guó)標(biāo)方法檢測(cè)瓜子中糞大腸菌 群陽(yáng)性檢出率為45%，改進(jìn)方法檢測(cè)瓜子中糞大 腸菌群陽(yáng)性檢出率為40%；整體趨勢(shì)上，改進(jìn)方 法測(cè)得結(jié)果略低于國(guó)標(biāo)方法，但改進(jìn)方法測(cè)得結(jié) 果均在國(guó)標(biāo)方法95%置信區(qū)間內(nèi)。

3 結(jié)論 

改進(jìn)后檢測(cè)方法與當(dāng)前國(guó) 標(biāo)方法相比，改進(jìn)方法檢測(cè)數(shù)值相關(guān)系數(shù)為 r=0.943，P=0.000，均在95%置信區(qū)間內(nèi)，統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義上無(wú)顯著區(qū)別。國(guó)標(biāo)方法(GB 4789.39—2013) 分為L(zhǎng)ST肉湯初發(fā)酵和EC肉湯復(fù)發(fā)酵兩個(gè)過(guò)程， 操作步驟較復(fù)雜，工作量較大，干擾因素多，需 要經(jīng)過(guò)48～72 h培養(yǎng)后才能得到測(cè)定結(jié)果，在進(jìn) 行大批量瓜子樣品檢測(cè)時(shí)耗時(shí)較長(zhǎng)[12-13] ；改進(jìn)方 法是直接進(jìn)行一步EC肉湯發(fā)酵過(guò)程，簡(jiǎn)單、快 捷、經(jīng)濟(jì)、高效，可在24 h內(nèi)得到測(cè)定結(jié)果，可 用于實(shí)際瓜子樣品大批量時(shí)的檢測(cè)。

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